Video: Je, ukolezi wa DNA huhesabiwaje kwa kutumia spectrophotometer?
2024 Mwandishi: Miles Stephen | [email protected]. Mwisho uliobadilishwa: 2023-12-15 23:41
Mkusanyiko wa DNA ni inakadiriwa na kupima kunyonya kwa 260nm, kurekebisha A260 kipimo cha turbidity ( kupimwa na kunyonya kwa 320nm), kuzidisha kwa sababu ya dilution, na kutumia uhusiano ambao A260 ya 1.0 = 50µg/ml safi dsDNA.
Watu pia wanauliza, unapataje umakini na usafi wa DNA?
Kutathmini Usafi wa DNA , pima ufyonzaji kutoka 230nm hadi 320nm ili kugundua uchafu mwingine unaowezekana. Ya kawaida zaidi hesabu ya usafi ni uwiano wa kunyonya kwa 260nm kugawanywa na kusoma kwa 280nm. Ubora mzuri DNA atakuwa na A260/A280 uwiano wa 1.7-2.0.
Vivyo hivyo, mkusanyiko mzuri wa DNA ni nini? A nzuri ubora DNA sampuli inapaswa kuwa na A260/A280 uwiano wa 1.7-2.0 na A260/A230 uwiano wa zaidi ya 1.5, lakini kwa kuwa unyeti wa mbinu tofauti kwa vichafuzi hivi hutofautiana, maadili haya yanapaswa kuchukuliwa tu kama mwongozo wa usafi wa sampuli yako.
Kuhusu hili, NanoDrop huhesabuje mkusanyiko wa DNA?
Unazidisha thamani ya kunyonya kwa 260 nm kwa sababu maalum (ni 50 kwa DNA ) na utapata Mkusanyiko wa DNA . Voilá. (Sawa ni kitaalam A260 ya sampuli nene ya mm 10 ambayo inazidishwa na 50; NanoDrop huonyesha A260 kana kwamba sampuli ilikuwa na unene wa 10mm, kama katika cuvette ya kawaida).
Kwa nini tulilazimika kutumia spectrophotometer ili kuhesabu DNA yetu?
A spectrophotometer ni uwezo wa kuamua viwango vya wastani vya asidi ya nucleic DNA au RNA iliyopo katika mchanganyiko, pamoja na usafi wao. Kutumia Sheria ya Bia-Lambert ni inawezekana kuhusisha kiasi cha mwanga kufyonzwa na mkusanyiko wa molekuli ya kunyonya.
Ilipendekeza:
Kuna uhusiano gani kati ya ukolezi wa enzyme na kiwango cha mmenyuko?
Kwa kuongeza mkusanyiko wa enzyme, kiwango cha juu cha mmenyuko huongezeka sana. Hitimisho: Kiwango cha mmenyuko wa kemikali huongezeka kadiri mkusanyiko wa substrate unavyoongezeka. Enzymes zinaweza kuongeza kasi ya kasi ya athari. Hata hivyo, vimeng'enya hujaa wakati ukolezi wa substrate ni wa juu
PH inahusiana vipi na ukolezi wa H+?
Mkusanyiko wa molar wa ioni za hidrojeni zilizofutwa katika suluhisho ni kipimo cha asidi. Mkusanyiko mkubwa zaidi, zaidi ya asidi. Mkusanyiko huu unaweza kuwa kati ya anuwai kubwa, kutoka 10^-1 hadi 10^-14. Kwa hivyo njia rahisi ya kupunguza safu hii ni kiwango cha pH ambacho kinamaanisha nguvu ya hidrojeni
Kwa nini ni bora kwa wanasayansi kutumia jina kutoka kwa mfumo sanifu wa taxonomic?
Kwa nini ni bora kwa wanasayansi kutumia jina kutoka mfumo sanifu taxonomic? Jina sanifu hutofautisha simba wa milimani na puma. Mfumo wa Linnaean taxonomic huainisha viumbe katika mgawanyiko unaoitwa taxa. Ikiwa viumbe viwili ni vya kundi moja la taxonomic, vinahusiana
Kwa nini spectrophotometer lazima iwekwe kwa urefu fulani wa wimbi?
Unaporekebisha urefu wa wimbi kwenye spectrophotometer, unabadilisha nafasi ya prism au diffraction grating ili urefu tofauti wa mwanga uelekezwe kwenye mpasuo. Upana mdogo wa mpasuko, ndivyo uwezo wa chombo wa kutatua misombo mbalimbali ni bora
Unapaswa kutumia uunganisho lini na ni lini unapaswa kutumia urekebishaji rahisi wa mstari?
Regression kimsingi hutumiwa kuunda mifano / milinganyo kutabiri jibu muhimu, Y, kutoka kwa seti ya vigeuzo vya utabiri (X). Uhusiano kimsingi hutumika kwa haraka na kwa muhtasari wa mwelekeo na nguvu ya mahusiano kati ya seti ya viambishi 2 au zaidi vya nambari