Orodha ya maudhui:

Unapataje mkusanyiko wa DNA kutoka kwa kunyonya?
Unapataje mkusanyiko wa DNA kutoka kwa kunyonya?

Video: Unapataje mkusanyiko wa DNA kutoka kwa kunyonya?

Video: Unapataje mkusanyiko wa DNA kutoka kwa kunyonya?
Video: Я ОДЕРЖИМЫЙ ДЕМОНАМИ 2024, Novemba
Anonim

Mkusanyiko wa DNA inakadiriwa kwa kupima kunyonya kwa 260nm, kurekebisha A260 kipimo cha tope (kipimo cha kunyonya kwa 320nm), ikizidisha kwa kipengele cha dilution, na kwa kutumia uhusiano ambao A260 ya 1.0 = 50µg/ml safi dsDNA.

Vivyo hivyo, watu wanauliza, unapataje mkusanyiko wa DNA?

Kuamua mkusanyiko wa DNA katika sampuli ya asili, fanya hesabu ifuatayo:

  1. ukolezi wa dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × sababu ya dilution.
  2. ukolezi wa dsDNA = 50 μg/mL × 0.65 × 50.
  3. ukolezi wa dsDNA = 1.63 mg/mL.

Pia, ukolezi mzuri wa DNA ni nini? A nzuri ubora DNA sampuli inapaswa kuwa na A260/A280 uwiano wa 1.7-2.0 na A260/A230 uwiano wa zaidi ya 1.5, lakini kwa kuwa unyeti wa mbinu tofauti kwa vichafuzi hivi hutofautiana, maadili haya yanapaswa kuchukuliwa tu kama mwongozo wa usafi wa sampuli yako.

Kwa njia hii, je, DNA inachukua saa 280 nm?

Uwiano wa kunyonya kwa 260 nm dhidi ya 280 nm ni kawaida hutumika kutathmini DNA uchafuzi wa suluhu za protini, kwani protini (haswa, asidi ya amino yenye kunukia) kunyonya mwanga kwa 280 nm.

Unatumiaje NanoDrop kwa mkusanyiko wa DNA?

Kimsingi nanodrop inakupa chaguo la kuchagua DNA , RNA, Protini. Unahitaji kuchagua DNA , kisha weka 2 ΜL za maji (mili Q preferent) chagua "Tupu" baada ya hapo weka 2 ΜL nyingine ya maji ili kuthibitisha kuwa kipimo ni 0. Kisha weka 2 ΜL ya sampuli yako. Utapata kipimo.

Ilipendekeza: