Je, mvua ya ethanol huondoa protini?
Je, mvua ya ethanol huondoa protini?

Video: Je, mvua ya ethanol huondoa protini?

Video: Je, mvua ya ethanol huondoa protini?
Video: Счастливая история слепой кошечки по имени Нюша 2024, Novemba
Anonim

Uchimbaji wa klorofomu ya phenol (tazama Kirby, 1957), kwa kawaida ikifuatiwa na mvua ya ethanol , ni njia ya jadi ya kuondoa protini kutoka kwa a DNA sampuli. Maji ya mumunyifu DNA partitions katika awamu ya maji, wakati protini denature mbele ya vimumunyisho vya kikaboni, hivyo kukaa katika awamu ya kikaboni.

Vivyo hivyo, je, ethanol huchochea protini?

Kunyesha kwa ethanoli ni njia moja ya kuondoa SDS na nyingine pombe uchafu mumunyifu kutoka protini sampuli na ndogo protini hasara. Ripoti hii inachunguza protini kupona baada mvua ya ethanol pamoja na umumunyifu ya SDS katika baridi 90% ethanoli.

Baadaye, swali ni, unafanyaje mvua ya ethanol? Utaratibu wa msingi ni kwamba chumvi na ethanoli huongezwa kwa suluhisho la maji, ambayo inalazimisha mvua ya asidi nucleic nje ya ufumbuzi. Baada ya mvua asidi ya nucleic unaweza kisha itenganishwe na suluhisho lingine kwa kuweka katikati.

Watu pia huuliza, je, mvua ya ethanol huondoa nukleotidi za bure?

Uchimbaji wa phenol-chloroform na Kunyesha kwa Ethanoli Kwa kuondolewa ya protini na zaidi ya nucleotidi za bure , phenoli: uchimbaji wa klorofomu na mvua ya ethanol ya nakala za RNA ndiyo njia inayopendekezwa.

Je, RNA inaondolewaje kutoka kwa DNA?

RNA Uchafuzi unaweza kuondolewa kwa kuongeza mikrolita 2 za RNase A (10 mg/ml, Fermentas) hadi mikrolita 20 za DNA kuyeyushwa katika bafa ya TE (Tris–EDTA, pH = 8.0) na kuangulia kwa saa 3–4 kwa 37 C.

Ilipendekeza: